固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。免疫染色固定液(Immunol Staining Fix Solution)由多聚甲醛、磷酸盐等组成,多用于免疫染色时细胞样品或组织切片的固定, 按照每个样品固定时需要1ml固定液计算,一个包装的免疫染色固定液可以固定100个样品。
操作步骤:
1、 对于细胞样本,去除培养液后,按六孔板每一孔加入1ml的比例,加入免疫染色固定液,固定时间控制在室温10~15min。
2、 其它样本应以充分盖样本为准,时间控制在室温10~15min,大标本应适当延长固定时间。
注意事项:
免疫染色固定液有一定刺激性和腐蚀性,请在通风环境下小心操作。
一经开启,尽快用完,储存过久的液体固定效果易下降。
温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
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