免疫染色封闭液(Immunol Staining Blocking Buffer)可以用于免疫染色时切片或细胞样品的封闭,可减小后续的一抗或二抗和样品的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。
免疫染色封闭液中含有Tris以及适量Triton X-100等,可以通透细胞膜,经该液封闭后的细胞样品可以检测细胞内的目的蛋白,包括细胞浆内和细胞核内的目的蛋白。按照每组样品封闭需要5~10ml免疫染色封闭液计算,一个包装的免疫染色封闭液可以封闭10次。
操作步骤:
1、 固定洗涤后的细胞或组织样本(注:石蜡切片需先脱蜡),加入适量Immunol Staining Blocking Buffer完全覆盖样本。
2、 在摇床上缓慢摇动,一般封闭60min。
3、 进行一抗孵育等后续操作。
注意事项:
如果摇动容易导致样本脱落,可以浸泡于该洗涤液中,无需摇动漂洗
一经开启,尽快用完,储存过久的液体固定效果易下降。
一般延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对免疫染色结果产生负面影响。
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